苦楝多糖

苦楝作为一种生物质杀虫剂和中药，近年来，其化学成分研究的比较广泛，已分离和鉴定了如烃类、柠檬素类、萜类、甾体、氨基酸等化合物，但对其多糖和脂肪酸的研究迄今尚未见报道。为了更好地开发和利用苦楝资源，本文对其果实多糖的提取、纯化、结构鉴定及生物活性进行了研究，同时考察了苦楝籽油的组成成分及其合成共轭亚油酸(CLA)的工艺条件。主要结论如下： 1．通过单因素试验和正交试验，得出苦楝多糖(MPS)浸提的最佳条件：提取温度85℃，乙醇浓度80％，时间2h；当料液比为1：20，多糖得率为5.89％，其中提取温度为主导作用。采用DEAE-52纤维素柱、Sephadex G-100柱层析分离纯化，SephadexG-200层析与聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定，从MPS中分离出3个分子量均一的组分，其中MPS-1含量约占61.2％。 2．利用薄层层析和气质联用对MPS和MPS-1进行了一级结构分析，得出MPS由阿拉伯糖、甘露糖和葡萄糖组成，面积归一化法测得相对百分含量比为3.37：4.86：1.0，MPS-1由阿拉伯糖和甘露糖组成，相对百分含量比1.13：1.0。通过凝胶色谱法测得MPS-1的表观分子量为2.89×10~5Dal。对MPS-1糖链中糖苷键及相邻糖基连接方式进行分析，由红外光谱知MPS-1的单糖残基以吡喃环和呋喃环的形式存在；由~1H-NMR和~(13)C-NMR谱图进一步看出，该多糖以甘露糖为主链，糖苷键构型为α连接；从高碘酸氧化和smith降解产物分析得出，该多糖主链以1→4键连接，支链以1→6键连接，综上所述，其构型如下： 3．对MPS-1进行了结构表征，Raman光谱进一步确定其为α构型；从圆二色谱图发现浓度、酸碱度和络合物等因素可影响该多糖的二级结构体系；从X-射线衍射图谱可知MPS-1在2θ为5°至70°范围内无明显的强吸收峰，为无定型态；通过差示扫描量热法得到MPS-1的玻璃化温度为41℃；从TG曲线中得到在加热过程中，有3次大的物质损失过程，而DTG曲线表明55.3℃、273.1℃、415.2℃处失重速度最快。 4．在体外抗肿瘤方面，MPS-1对人胃癌细胞BGC-823具有良好的增殖活性，IC_(100)＞81.68％，对其它几个细胞抑制不好。在清除羟自由基和过氧化氢方面，MPS-1比MPS具有更好的活性，当剂量为0.6mg时，MPS-1对OH的抑制率可达81.0％；当剂量达到10.24mg时，MPS-1对H_2O_2的抑制率可达到86.6％；在清除超氧阴离子自由基方面，MPS比MPS-1具有较好的效果。此外，两者的还原力在测定剂量中没有显著差异(P＞0.05)，且还原力随剂量的增加而升高。 5．对苦楝籽油的组成成分和理化性质进行了研究，主要成分为棕榈酸7.17％、硬脂酸4.16％、油酸25.72％、亚油酸62.47％、花生酸0.24％、花生一烯酸0.23％。其中籽油出油率可达31.44％，利用碱法将其合成为CLA，建立了二次旋转回归模型，即y=-25.22685+0.29158x_1+0.32346x_2-35.99539x_3+0.00084875x_1x_2+0.41808x_1x_3+1.71583x_2x_3-0.00087293x_1~2-0.10295x_2~2-355.68649x_3~2，R~2=0.9861，由此得到其最佳工艺：反应温度183.8℃，反应时间2.86h，碱浓度6.43％。此外，还考察了合成出产品的氧化稳定性，加入茶多酚能明显抑制CLA的氧化，且有效加入量为80ppm。